Wedharan

Konsep-konsep rekayasa jaringan yang kompleks harus dievaluasi sehubungan dengan penerapan klinisnya. Dengan demikian, tujuan keseluruhan hendaklah untuk menetapkan metode yang idealnya dapat diselesaikan dalam rentang kala yang singkat sebelum atau selama prosedur bedah regeneratif sineja. Selama beberapa tahun pungkasan, PRF Choukroun sudah terbukti jadi metode yang mendekati konsep ideal tentang rekayasa jaringan terpandu yang "pintar". Seperti yang ditunjukkan sebelumnya, bentuk PRF ini mengandung faktor pertumbuhan seperti TGF-β1 dan PDGF-AB²³ dan dapat berkontribusi untuk regenerasi jaringan sehubungan dengan osteoblas, prekeratinosit, dan diferensiasi fibroblast gingiva.¹⁸

Meskipun percobaan yang disebutkan di atas menunjukkan konsep ini punya kapasitas yang menjanjikan sehubungan dengan kontribusinya untuk regenerasi jaringan yang sukses, sampai sekarang ini, belum ada penelitian yang menunjukkan sejauh mana sel-sel didistribusikan ke dalam perancah fibrin dalam kaitannya dengan dua parameter penting, yaitu: parameter kecepatan sentrifugasi dan kala sentrifugasi.

Dalam penelitian ini, kami telah menunjukkan bahwa T-limfosit, B-limfosit, sel induk, dan monosit ditemukan pada kedua kelompok dalam 25–30% bagian proksimal pertama dari gumpalan itu. Tidak ada perbedaan yang secara statistik signifikan di antara kedua kelompok sehubungan dengan sebaran sel-sel tersebut.

Proses regenerasi atau perbaikan jaringan membutuhkan reaksi harmonis dari berbagai macam sel, termasuk sel respons imun (neutrofil, makrofag, limfosit), sel epitel, fibroblas, dan sel induk, serta sel lain yang relevan untuk jaringan sineja. Konsep scaffold PRF tampaknya menjadi sumber komponen yang ideal untuk proses penyembuhan. Perancah darah yang diturunkan secara autologis dapat menjadi sumber unik sel-sel induk hematopoietik (HSC), yang sangat penting dalam kedokteran regeneratif. Dalam dasawarsa pungkasan, banyak penelitian menyoroti potensi diferensiasi yang luas dari HSC.^28,29 Tinjauan baru-baru ini oleh Ogawa et al menyajikan bukti kuat untuk kapasitas pluripotent HSC dan pekerjaan rinkes yang telah dilakukan dalam bidang ini.³⁰ Terlepas dari kemampuan mereka untuk mengisi kembali sebagian besar macam sel dalam tubuh, sel induk juga berperan sebagai modulator imun³¹: Sel-sel tersebut dapat menargetkan B-limfosit dan merangsang sekresi antibodi, menghambat atau bahkan mengarah pada apoptosis T-limfosit, dan mendorong toleransi kekebalan.

Sel-sel lain yang teramati dalam gumpalan fibrin tahap lanjut ini adalah B-limfosit B dan T-limfosit. Limfosit bertanggungsaur untuk intervensi spesifik dan tidak spesifik dalam respon jaringan untuk cedera, meskipun mereka tidak menonjol pada fase pertama perbaikan jaringan. Suatu penelitian oleh Boyce et al mengungkapkan bahwa T-limfosit CD8 + menurunkan penyembuhan luka, sedangkan B-limfosit berkaitan dengan peningkatan penyembuhan.^32,33

Berlawanan dengan sel-sel yang disebutkan di atas, platelet tersebar secara lebih merata di seluruh gumpalan. Tampak bahwa penurunan kecepatan sentrifugasi dan peningkatan kala sentrifugasi metuken konsentrasi platelet yang lebih tinggi di bagian distal gumpalan darah, meskipun pengamatan ini tidak terbukti secara definitif. Platelet yang memberi nama untuk perancah kaya fibrin ini (yaitu fibrin kaya platelet) tidak hanya ada dalam jalur koagulasi atau penutupan luka primer tetapi juga punya potensi regeneratif yang luas dengan melepaskan aneka spektrum sitokin, kemokin, faktor pertumbuhan , dan mediator lainnya. Platelet bisa melepaskan, antara lain, molekul seperti faktor von Willebrand, P-selectin, fibronectin, VEGF, PDEGF, vitronektin, dan fibrinogen. Dengan berbagai faktor pertumbuhan, molekul adhesi, dan mediator lainnya ini, platelet punya kemampuan untuk memulai dan memodulasi respon imun inang melalui pengaruh neutrofil, monosit, dan sel endotel, serta limfosit. Setelah stimulasi, platelet aktif berpartisipasi dalam deteksi, penangkapan, dan sekuestrasi patogen. Mereka bahkan dapat maraken layanya target seluler yang terinfeksi. Karena berbagai kegiatan ini, platelet terlihat pada setiap langkah regenerasi.³⁴

Monosit juga penting untuk penyembuhan jaringan. Monosit bermigrasi ke derah peradangan setelah masuknya neutrofil, di mana monosit kemudian menjadi makrofag.³⁵ Makrofag adalah sel multifungsi yang menyulihi fenotip yang berbeda. Makrofag punya peran substansial dalam respon terhadap benda asing, osteogenesis, dan angiogenesis ketika mereka menanggapi biomaterial yang masuk.^36,37 Melalui ekspresi VEGF, PDGF, FGF, TGF-α dan TGF-β, dan molekul aktif biologis lainnya (misalnya, BMP-2), makrofag mendukung proliferasi sel dan pemulihan jaringan setelah cedera.^36,38 Makrofag terlihat di seluruh proses perbaikan jaringan dari peradangan purwa hingga renovasi jaringan dan pembentukan bekas luka.³⁸

Salah satu temuan yang paling penting dari penelitian ini adalah bahwa perubahan protokol sentrifugasi dalam hubungannya dengan kala dan kecepatan sentrifugasi mengarah ke pola distribusi yang berbeda untuk granulosit neutrofilik. Granulosit neutrofilik paling sering dianggap sebagai sel inflamasi dini karena kapasitas fagositosis, degranulasi, dan perangkap ekstraseluler neutrofiliknya.^40,41 Namun, penelitian terbaru menunjukkan bahwa granulosit neutrofilik punya properti regenerasi jaringan juga. Neutrofil juga memfasilitasi lalulintas monosit ke dalam luka untuk mem-fagositosis sisa-sisa inflamasi  (sel nekrotik dan apoptosis).^40,42 Lebih lagi, neutrofil juga berpartisipasi dalam proses debridemen luka dengan mengeluarkan beberapa protease, termasuk MMP9, yaitu suatu matrix ekstraseluler yang mencerna enzim. Juga, granulosit neutrofilik yang mengekspresikan MMP9 turut berperan dalam proses revaskularisasi cacat jaringan dengan direkrut, contohnya, direkrut oleh VEGF-A.^17,40 Granulosit neutrofilik dan monosit/ makrofag  saling berkomunikasi, dan interaksi mereka berkontribusi pada diferensiasi lebih lanjut menuju keadaan pro-inflamasi atau anti-inflamasi makrofag. Selain itu, penelitian terbaru Tan et al mengungkapkan potensi kontribusi neutrofil terhadap limfogenesis inflamasi oleh modulasi VEGF-A dan sekresi VEGF-D dalam model murine. Sel-sel ini memodulasi respon bawaan serta respons imun adaptif secara langsung dan tidak langsung dengan komunikasi silang dengan B-limfosit dan T-limfosit.⁴⁴ Dengan demikian, distribusi granulosit neutrofilik dalam gumpalan A-PRF bisa menjadi dasar untuk fungsionalitas yang lebih baik dari monosit / makrofag / limfosit transplantasi (tetapi juga monosit / makrofag / limfosit residen) dan penyebarannya untuk mendukung regenerasi jaringan.

Selain peran granulosit neutrofilik dalam peradangan dini dan properti regeneratif potensialnya, harus dipertanyakan pula mengapa granulosit mampu bermigrasi lebih jauh ke dalam matriks gumpalan. Salah satu pendekatan untuk mangsuli pertanyaan ini adalah diameter neutrofilik. Dengan demikian, dengan diameter rata-rata 8,5-10 μm, granulosit neutrofilik jauh lebih kecil daripada monosit (diameter 15-20 μm⁴⁵) dan karena itu bisa lebih rentan untuk menembus lebih dalam ke dalam gumpalan selama proses sentrifugasi. Tapi, jika ini benar, butuh diketahui apakah berat neutrofil berkorelasi dengan diameternya. Pada dasarnya, diferensial sentrifugasi didasarkan pada perbedaan laju sedimentasi partikel (biologis) yang berbeda ukuran, bentuk, dan kepadatan, serta kondisi sentrifugasi. Namun, penelitian ini gagal mengungkap mengapa granulosit neutrofilik, mliginya, "bereaksi" terhadap modifikasi dalam protokol sentrifugasi. Oleh karena itu, penelitian lebih lanjut harus dilakukan untuk memvalidasi temuan ini dan memberi penjelasan widyan untuk perilaku neutrofil yang berbeda.

Di antara gagasan-gagasan yang kala ini sedang dikembangkan di bidang regenerasi jaringan — seperti penggunaan ko-kultur atau monokultur, contohnya dengan osteoblas atau fibroblast³ — konsep PRF bisa menjadi komponen tambahan yang cocok untuk penerapan klinis. Konsep metuken matriks yang dibenihkan sel berbasis fibrin hanya dengan mengambil darah dan sentrifugasi selama 12-14 menit benar-benar revolusioner dari segi kepraktisan klinis, karena dapat ditangani dan dimodifikasi dengan mudah dalam periode kala yang singkat dan menyediakan bagi bagian yang rusak bukan hanya dengan matriks yang membisakan migrasi sel ke area yang cacat, tetapi juga menyediakan bagi luka dengan sasmita biologis yang penting, yang berpotensi mempercepat proses penyembuhan luka: Ini termasuk PDGF, TGF-β, PF4, IL-1, VEGF, faktor pertumbuhan epidermal, ECGF, PDEGF, ILGF, osteocalcin, osteonektin, fibrinogen, vitronektin, fibronektin, dan trombospondin.⁶ Lebih jauh, fakta bahwa matriks diwetuken oleh darah pasien sendiri (yaitu, autologous) membuatnya hampir tidak ada risiko penolakan  (respons tubuh terhadap benda asing).

Masa depan konsep-konsep rekayasa jaringan yang dapat diterapkan secara klinis pangintenan besar akan dipelopori oleh konstruksi jaringan berbasis sel yang dapat diwetuken dalam rentang masa yang singkat dan dalam jarak yang dekat dengan pasien. Namun demikian, masih harus diketahui bagaimana konstruksi ini, termasuk variasi PRF Choukroun, akan berinteraksi secara in vitro dan in vivo setelah kombinasi dengan osteoblas yang dikultur, fibroblast, atau campuran dengan butiran osteokonduktif in vivo. Masih harus ditunjukkan dalam penelitian klinis yang dirancang dengan baik bahwa matriks berbasis fibrin ini dapat memfasilitasi rekayasa jaringan tulang dengan menghindari secara simultan hambatan seperti infeksi, penolakan, dan metode isolasi yang rumit. Diharapkan, penelitian klinis tersebut juga akan mengungkapkan sejauh mana granulosit neutrofilik berkontribusi terhadap properti regeneratif PRF.

Simpulan

Data kala kini menunjukkan bahwa macam sel spesifik tersebar secara berbeda bergantung pada gaya sentrifugal (kumulatif). Konsep ini memampukan perancah atau komposit optimal untuk disesuaikan dengan penerapan klinis yang spesifik. Komposit yang kuat bisa membantu penyembuhan luka dan perbaikan jaringan serta regenerasi jaringan. Selain itu, A-PRF tampaknya menjadi penyedia sel autologous yang ideal (terutama neutrofil dan makrofag), sehingga memampukan stimulasi timbal balik, karenanya menciptakan hubungan sinergis untuk kepentingan regenerasi jaringan.